NY∕T 3138-2017 饲料中艾司唑仑的测定 高效液相色谱法(农业)
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ID： |
078091617CA94D09A2182292A7267CBC |
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文件大小(MB)： |
0.39 |
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页数： |
7 |
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文件格式： |
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日期： |
2021-12-25 |
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ICS 65.120,B 46 NY,中华人民共和国农业行业标准,NY/T 3138-2017,饲料中艾司瞠仑的测定,高效液相色谱法,Determination of estazolam in feeds一,High performance liquid chromatography,2017 -12-22 发布2018 - 06-01 实施,咀中华人民共和国农业部发布,.. -',目。昌,本标准按照GBj T 1. 1一2009 给出的规则起草,本标准由农业部畜牧业司提出,本标准由全国饲料工业标准化技术委员会(SACj TC 76) 归口,本标准起草单位: 农业部饲料质量监督检验测试中心(广州) ,本标准主要起草人: 肖田安、方秋华、廖雁平、江庆姊、陈运勤、伍宏凯、胡苑玲,NYjT 3138-2017,I,NY/T 3138-2017,饲料中艾司哇仑的测定高效液相色谱法,1 范围,本标准规定了饲料中艾司瞠仑测定的高效液相色谱法,本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、添加剂预i昆合饲料以及精料补充料中艾司哇仑的测定,本标准中艾司哇仑的检出限为0.10 mg/,.,2 规范性引用文件,日期的版本适用于本文,的4,件,文引,本的,于期,对日,件注,文不,列是,下凡,件,GB/ T 14699. 1,3 原理,色谱法检,测，外标法,4 试剂与,4. 1 艾司,4. 2,4.3,4. 4,4.5 碳酸铀,4.6 磷酸二氢钢,4. 7 二氯甲皖,4. 8 正己皖0,4. 9 甲酸,4. 10 氨水,4. 11,4. 12 2% 甲酸水溶液:取甲酸2mL ，用水稀释至100 mL ,4. 13 5 %氨水甲醇榕液:取氨水10 mL ，加甲醇至200 mL ，混匀,4. 14 0.4 %磷酸二氢饵溶液:取磷酸二氢梆4 g ，用水榕解并稀释至1000 mL ,4. 15 提取液:取二氯甲皖与正己烧以体积比1 : 1 的比例混匀,4.16 艾司瞠仑标准储备溶液(1. 0 mg/ mL) : 准确称取艾司瞠仑标准品50 . 00 mg ，于50mL 容量瓶中,用甲醇(4 . 3) 溶解并稀释至刻度，配制成浓度为1. 0 mg/ mL 的标准储备溶液。4 0C 保存，保存期6 个月,4. 17 艾司瞠仑标准工作溶液(50μg/ mL) : 准确量取艾司哇仑标准储备榕液(4.16)1 mL ，于20 mL 容,NY/T 3138-2017,量瓶中，用甲醇( 4 . 3 ) 稀释并定容，配制成浓度为50μg/ mL 的标准工作榕液。4 0C 保存，保存期3 个月,4. 18 罔相萃取柱:混合型阳离子交换柱， 60 mg/ 3mL; 或相当者,5 仪器设备,5. 1 高效液相色谱仪:配二极管阵列检测器,5. 2 分析天平:感量0.01 mg ,5. 3 天平:感量0 . 001 g ,5. 4 离心机:转速为50 00 r/ min 及以上,5. 5 水平振荡器,5. 6 涡旋1昆合器,5. 7 旋转蒸发仪,5.8 罔相萃取装置,5. 9 氮吹仪,5. 10 微孔滤膜: 0.45μm ，有机相,6 试样制备,按照GB/ T 14699.1 的规定抽取有代表性的饲料样品，用囚分法缩减取样。按照GB/ T 20195 的,规定制备样品，粉碎后过0.45 mm 孔径的分析筛，充分混匀，装入磨口瓶中，密闭备用,7 分析步骤,7. 1 提取,称取试料2 g(精确到0 . 001 g) ，于50 mL 聚丙烯离心管中。加入水20 mL ，用10 %碳酸铀水榕液,(4.11) 调pH 至8.5 ~9 .0 ，加入氯化铀19 。加人提取液(4 . 15)15 mL ，中速振荡10min 后， 5000 r/ min,离心5 min ，将上层有机相转人梨形瓶中。残渣再用提取液(4.15)15 mL 重复提取一次，合并提取液，在,(35 士2)'C 下旋转蒸发至干。用5mL 甲醇(4 . 3) 榕解梨形瓶中的残留物，备用,7. 2 净化,MCX 国相萃取柱用3mL 甲醇(4. 3) 、3mL 水活化，取备用液(7 . 1)过柱，用3 mL 2% 甲酸水恪液,(4.12) 、3mL 甲醇(4.3) 淋洗，用5 % 氨水甲醇溶液(4.13 月mL 洗脱，收集洗脱液， 4 5'C 下氮气吹干，准,确加人1. 0 mL 甲醇(4.3) 榕解残渣，过0 . 45μm 的滤膜，供高效液相色谱测定,7. 3 标准曲线的制备,精密量取艾司I挫仑标准工作溶液(4. 1 7)适量，用甲醇(4 . 3) 稀释，配制成浓度为0 . 20μg/ mL 、0 . 50,μg/ mL 、1. 0 μg/ mL 、2.0 μg/ mL 、5.0 p.g/ mL 、10.0 μg/ mL 、20 . 0 μg/ mL 的系列标准榕液，供高效液相,色谱分析。以色谱峰面积为纵坐标、对应的标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线，求回归方程,8 测定,8. 1 在相色谱参考条件,2,色谱柱:C1 8 柱，柱长250 mm ，内径4 . 6mm ，粒径5μm; 或性能相当者;,流动相A 为乙脯，流动相B 为0 . 4%磷酸二氢抑、溶液，梯度洗脱程序见表1;,流速: 1. 0 mL/ min;,检测波长: 222 nm;,进样量: 20 μL;,NY/T 3138-2017,柱温:30 0C ,表1 艾司瞠仑梯度洗脱程序表,时间， min 流动相A ，% 流动相日， %,0.0 44 56,10 44 56,11 75 25,15 75 25,16 44 56,20 44 5……
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